| 试剂盒组成 |
500T |
保存 |
| 试剂 A |
100ml |
4℃（常温运输） |
| 试剂 B |
1.5ml×2 |
4℃（常温运输） |
| BSA 标准品①（2000 μg/mL） |
1ml |
-20℃（常温运输） |
| BSA 标准品②（1500 μg/mL） |
1ml |
-20℃（常温运输） |
| BSA 标准品③（1000 μg/mL） |
1ml |
-20℃（常温运输） |
| BSA 标准品④（750 μg/mL ） |
1ml |
-20℃（常温运输） |
| BSA 标准品⑤（500 μg/mL ） |
1ml |
-20℃（常温运输） |
| BSA 标准品⑥（250 μg/mL ） |
1ml |
-20℃（常温运输） |
| BSA 标准品⑦（125 μg/mL ） |
1ml |
-20℃（常温运输） |
| BSA 标准品⑧（0 μg/mL ） |
1ml |
-20℃（常温运输） |
备注：BSA 标准品长期 保存 -20 ℃（常 温运 输），收到后按照上面指示的温度保存各成分，一年有效
产品介绍
BCA 蛋白 定量试剂 盒是一种基于二 喹啉甲酸BCA（ Bicin-choninic Acid）， 利用比色法测定总蛋白浓度的试剂盒，是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。其原理为在碱性条件下蛋 白 质中 的肽键将 Cu 还原成Cu ，BCA螯 合Cu 作 为显色 剂，产 生蓝 紫色复合物并在562 nm处有吸收峰，颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。 BCA 蛋 白定量 试剂盒（即 用型）是在常规 BCA 蛋 白定量 试剂盒基础 上研制的含有一系列浓度的蛋白质标准品（BSA溶液），即取即用，无需稀释，方便快捷。
操作步骤
1.将配套即用型BSA标准品-20℃冰箱取出室温融化，上下颠倒混匀备用。
2.计算确定所需的工作液的总体积：
BCA工作液的总量=（BSA标准品样本个数+待测样本个数）×复孔数× 每个样本所需BCA 工作液的体积
举例：本次试剂盒质检需要做BSA 标准品样本个数为8个，待测样本个数3个，复孔数为 3个。
BCA工作液的总量=（8+3）×3×200 μL（每个样本工作液体积）=6.6 mL
3.根据计 算出的BCA 工作液 的体积，将试剂A 与试剂 B 按照50:1 的体积 比，配制BCA 工作液，并充分混匀。
注：1）由于加样可能存在误差，建议配制工作液的时候多配制1~2个孔的量；
2）当试剂B 加入到试剂A时，开始可观察到有浑浊产生，属于正常现象，经搅拌后
浑浊会迅速消失，得到苹果绿色澄清工作液。
4.取各个稀释浓度的BSA标准品20 μL，加入到96 孔透明板中；
5.在每个孔中加入200 μL工作液充分混匀，盖上96孔板，37℃ 恒温培养箱孵育30分钟；
6.用酶 标仪测定每个样品及 BSA 标准 品的A562 或者540~590 nm之间 的其它波长的吸 光度；
7.绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。
注：
1）每个样品及BSA标准品的A562需要减去空白对照的吸光度；
2）数据处理时需要剔除明显异常的点或者数值；
3）样品浓度如果太高超过上限（2000 μg/mL）应该适当进行稀释，样品浓度 太低 建议适当浓缩。
注意事项
- 试剂 A 如果低温条件下出现絮状结晶时，可 37℃使其完全溶解，不影响使用；
- 蛋白标准溶液（BSA）最好提前放到室温融化，并且上下颠倒混匀；
- 建议每次测定蛋白样品时，都要绘制标准曲线，使测量结果准确；
- 为了提高样品测量结果的准确性，样品浓度不宜太高或者太低，否则需要提前稀释或者 浓缩；
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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